苏州医工所检验技术室在内毒素检测方面获研究进展

作者:孙海旋 时间:2016-03-07

  内毒素是革兰氏阴性菌细胞壁上的一种脂多糖复合物,细菌死亡或自溶后便会释放出内毒素。当其大量进入血液就会引起热原反应,可引起发热、微循环障碍、内毒素休克及播散性血管内凝血等。内毒素检测主要应用在药品、生物制品和医疗器械的质量控制,以及临床相关疾病的诊断预后。中国药典收录的内毒素检查法包括凝胶法和光度法,使用鲎试剂来定性或定量检测内毒素,近年来逐渐发展出荧光光谱和电化学检测方法。 

  近期,苏州医工所王弼陡课题组开发了一套弹力谱检测系统,可以实现内毒素的快速高灵敏检测,是该检测系统在凝血功能检测、指导成分输血等临床检验领域之外新的应用。该检测系统的基本原理是通过连续监测待测样本的粘弹性变化来研究其中的生化反应过程,能获得全谱信息。具体来讲,通过该检测系统监测鲎血提取液在内毒素激活下形成凝胶的动力学过程来指示待测样品中内毒素的含量。通过记录标准样品的弹力图中弹力达到0.1振幅时所需的时间,作出标准曲线,与待测样品所需时间进行对比从而可计算出待测样品中的内毒素含量。 

   1 (a) 弹力谱检测系统. (b) 弹力测量单元原理示意图.

  研究表明,采用弹力谱图来检测内毒素,检测灵敏度极高,可以达到0.002 EU/mL,远远超过常规检测方法的检测限;试剂的用量小,与常规监测方法相比,降低了检测的成本;另外,可在较短的时间内完成监测,比常规检测方法的检测时间比至少缩短一半。该检测技术是采用力学的方法解决生物学检测的问题,在内毒素检测方面相比常规检测方法如光学比浊法、电化学法、流式细胞法等有巨大优势。

  相关成果已发表( Analyst, 140 (13), 2015, 4374-4378. IF4.107)

  以上工作得到了江苏省科技支撑计划项目“血栓弹力谱测试系统的研究”的支持。  

   2 弹力谱法、电化学法和浊度法测量结果比较图     

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